近年來細胞治療領域取得的進步大大提升了對T細胞擴增技術的需求。T 細胞必須能夠迅速擴增,才能在維持高存活率和T細胞屬性的同時達到高細胞密度。攪拌罐生物反應器是實現大規模擴增的最佳細胞培養工具之一。然而,在生物反應器內進行細胞培養需接種大量細胞。我們開發出了利用透氣袋為臺式生物反應器接種生產足量T細胞的方法。 我們利用放置在New Brunswick S41i CO2恒溫搖床內的透氣袋進行懸浮T細胞培養,并測試了來自不同制造商的細胞培養袋,最大灌注量從120 mL到5 L不等。此外, 我們還測試了不同的振蕩速度,以確定T細胞擴增的最佳條件。由于T細胞放置在固定平臺上無法生長,所以需要適當的振蕩。我們還探索了更傳統的利用振蕩搖瓶進行懸浮培養的方法。結果表明,使用透氣袋更為成功,不到4天其擴增量就超過了10倍,而在搖瓶中則只擴增了 2-3 倍。綜上所述,我們利用透氣袋和CO2恒溫搖床,建立了一種在攪拌罐生物反應器內大規模制備培養T細胞的方法。